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Doutorado - atuais


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José Luis Rodríguez Bautista

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Lattes

CV Lattes: CV: http://lattes.cnpq.br/2159598084648328

Isolation, in vitro propagation and molecular characterization of strains of Anaplasma marginale isolates obtained from ticks and blood from dairy calves

Resumo

A anaplasmose é uma doença endêmica em áreas tropicais e subtropicais e gera perdas econômicas consideráveis para as indústrias de carne e laticínios em todo o mundo. O melhoramento das metodologias diagnosticas e dos imunógenos usados para seu controle são um tema de interesse atual. A identificação das principais características fenotípicas e genotípicas de isolados de diferentes origens geográficas é um tema fundamental no desenho de ferramentas diagnosticas e de imunização. Este projeto tem como objetivos, diagnosticar a infecção em sangue e em carrapatos portadores de Anaplasma marginale de bovinos infestados naturalmente em fazendas de diferentes regiões nos estados de Minas Gerais, do Rio de Janeiro e da Orinoquía Colombiana e proceder ao isolamento e a propagação da rickettsia em cultivos in vitro em linhagens de células de carrapatos. O estudo será realizado no Laboratório de Doenças Parasitárias (LDP) da UFRRJ. Os carrapatos serão desinfetados após a coleta, e os tecidos serão dissecados para culturas de órgãos. Macerado de carrapatos e sangue coletados de bezerros doadores com parasitemia positiva para A. marginale serão incubados em cultivo de células IDE8.  Os cultivos serão mantidos em monocamadas de linhagens de células IDE8 e incubados a 34 °C. A manutenção dos cultivos será feita com trocas frequentes de meio ate atingir visualização de formas compatíveis com o crescimento bacteriano. Analise genotípico e filogenético será realizado aos isolados obtidos a partir das amostras tanto de sangue quanto dos carrapatos. Os principais resultados esperados incluem o isolamento, propagação e caracterização genotípica de cepas de Anaplasma marginale, o aperfeiçoamento da metodologia e dos procedimentos para cultivo e propagação em células embrionárias. A metodologia utilizada propõe a substituição de animais de experimentação biológica convencionalmente usados na produção e replicação deste tipo de microrganismos.